摘要：為建立快速、靈敏且可定量檢測(cè)氟苯尼考耐藥基因floR的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法(LAMP),根據(jù)GenBank登錄的革蘭陰性菌floR基因保守序列,利用PrimerExploerV4設(shè)計(jì)特異性LAMP引物,成功建立了快速檢測(cè)氟苯尼考耐藥floR基因的LAMP方法。該LAMP檢測(cè)方法反應(yīng)溫度為63℃,反應(yīng)時(shí)間為60min,具有可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)、定量檢測(cè)出floR基因的拷貝數(shù),以及操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn),靈敏度高,檢測(cè)限為6.24×100拷貝,是普通PCR的100倍。用建立的方法檢測(cè)對(duì)氟苯尼考不同敏感性的大腸埃希菌floR基因,結(jié)果顯示,對(duì)氟苯尼考敏感、中介和耐藥的菌株均檢測(cè)到floR基因,其拷貝數(shù)與菌株MIC相關(guān),提示floR基因不僅存在于氟苯尼考耐藥菌中。所建立的floR基因LAMP檢測(cè)方法可為floR基因的監(jiān)測(cè),以及氟苯尼考耐藥性產(chǎn)生和傳播機(jī)制的研究提供新的技術(shù)手段。