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人主動脈夾層血管平滑肌細胞的培養(yǎng)和鑒定

作者:盧琳; 吳錫階; 彭華; 陳良萬 福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院心外科; 福州350001

摘要:目的建立人主動脈夾層(AD)血管平滑肌細胞(VSMC)體外培養(yǎng)的方法。方法以AD患者手術(shù)時切除的血管為原料,用組織塊貼壁法進行VSMC的體外原代和傳代培養(yǎng),倒置顯微鏡觀察細胞的生長情況,考馬斯亮藍染色、α-SMA及Ⅷ因子免疫熒光染色和透射電鏡檢測鑒定細胞。結(jié)果7~10d原代細胞從組織塊邊緣遷移出來,3~4周細胞生長至融合,可進行傳代。原代和傳代的細胞生長良好,倒置顯微鏡下見細胞呈長梭形,有多個突起。細胞呈"峰谷狀"生長,具有典型的VSMC特征??捡R斯亮藍染色和透射電鏡下均可見細胞內(nèi)有大量沿長軸生長的肌絲,α-SMA免疫熒光染色強陽性,Ⅷ因子免疫熒光染色陰性,證明所培養(yǎng)的細胞為VSMC。細胞傳代至第6代以后開始出現(xiàn)老化現(xiàn)象。結(jié)論應(yīng)用組織塊貼壁培養(yǎng)的方法可成功地在體外培養(yǎng)人AD的VSMC,為今后研究AD的發(fā)病機制提供良好的實驗基礎(chǔ)。

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福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報雜志

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