摘要：本研究利用響應(yīng)面法優(yōu)化重組大腸桿菌的培養(yǎng)基提高了其表達(dá)丙酮酸氧化酶的產(chǎn)量。首先,單因素優(yōu)化實(shí)驗(yàn)表明pH、甘油濃度、酵母粉濃度、胰蛋白胨濃度分別為pH7、0.3%、1.2%、0.6%時(shí)有利于重組大腸桿菌表達(dá)丙酮酸氧化酶。進(jìn)而,利用Box-Behnken法對(duì)甘油、酵母粉、胰蛋白胨設(shè)計(jì)三因素三水平實(shí)驗(yàn),通過響應(yīng)面回歸分析,得到模型預(yù)測(cè)的最優(yōu)培養(yǎng)基條件。在0.6%甘油、3.18%酵母粉和0.44%胰蛋白胨的培養(yǎng)基條件下重組大腸桿菌產(chǎn)丙酮酸氧化酶有最高活力。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果丙酮酸氧化酶活力達(dá)到(17194.9±504.9)U/L,與模型的預(yù)測(cè)值相近,比未優(yōu)化前提高了1.7倍。本研究結(jié)果為丙酮酸氧化酶的大規(guī)模生產(chǎn)和工業(yè)化應(yīng)用提供了基礎(chǔ)。