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體外定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化為內(nèi)皮細(xì)胞及其與臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的比較

作者:汪雁歸; 毛蕭蕭; 楊天倫 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院心內(nèi)科; 長(zhǎng)沙410008; 湖南省人民醫(yī)院老年病科; 長(zhǎng)沙410005

摘要:目的:研究干細(xì)胞定向分化為內(nèi)皮細(xì)胞的效率,并與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)比較。方法:用兩步法誘導(dǎo)干細(xì)胞HUES9分化為內(nèi)皮細(xì)胞,前3 d在N2B27培養(yǎng)基中加入骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(25 ng/m L)和肝糖原合成激酶3β受體的選擇性抑制劑CHIR99021(10μmol/L)使細(xì)胞分化到中胚層狀態(tài),第4天開(kāi)始用VEGF165(200 ng/m L)和Forskolin(2μmol/L)將細(xì)胞誘導(dǎo)為內(nèi)皮細(xì)胞。觀(guān)察分化第6天細(xì)胞形態(tài),并與HUVECs比較。用CD144作為內(nèi)皮細(xì)胞表面標(biāo)志物,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分化效率及分化后細(xì)胞的身份。比較兩種內(nèi)皮細(xì)胞遷移和成管能力。結(jié)果:分化后的內(nèi)皮細(xì)胞與HUVECs在顯微鏡下形態(tài)一致。分化細(xì)胞表面標(biāo)志物陽(yáng)性率達(dá)到73.4%,重新培養(yǎng)后的內(nèi)皮細(xì)胞表面CD144陽(yáng)性率達(dá)到86.6%,HUVECs為94.4%。分化后的內(nèi)皮細(xì)胞與HUVECs均具有良好的遷移和成管能力,但分化后的內(nèi)皮細(xì)胞能力不如HUVECs強(qiáng)。運(yùn)用SB431542后,能夠提高分化后內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和成管能力。結(jié)論:此兩步法將干細(xì)胞分化為內(nèi)皮細(xì)胞有較高的分化效率,可作為理想的分化方法。

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湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)雜志

湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)雜志, 雙月刊,本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向,堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性,刊載內(nèi)容涉及的欄目:法學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)、管理學(xué)、文學(xué)、語(yǔ)言學(xué)、教育研究等。于1995年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。

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