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人胱抑素C大腸桿菌表達載體構建及包涵體復性研究
作者：何慶; 劉帥; 周海霞 德州學院生命科學學院功能性生物資源開發(fā)與利用省高校重點實驗室; 山東德州253023
摘要：構建大腸桿菌(E.coli)人胱抑素C基因(cysC)表達載體,并探究包涵體胞外復性方法.方法:將人胱抑素C基因克隆至原核表達載體pET32a上,電擊轉化至大腸桿菌BL21菌株中. IPTG誘導cysC表達,超聲破碎后采用SDS-PAGE電泳檢測CysC蛋白表達情況,并應用親和層析和透析復性方法對CysC蛋白進行純化和復性.結果:IPTG誘導培養(yǎng)重組菌BL21-cysC,可見沉淀和上清中均有pET32a-cysC蛋白表達,且沉淀中表達量更高.采用鎳柱及透析方法對表達產物進行純化,經SDS-PAGE檢測,可見分子量約34kD大小的蛋白條帶. Western Blotting檢測顯示經純化、復性后的重組CysC蛋白具有一定免疫學活性.結論:本實驗成功構建大腸桿菌cysC表達重組工程菌,經純化、復性得到的重組CysC蛋白具有一定免疫活性.
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惠州學院學報雜志
惠州學院學報雜志， 雙月刊，本刊重視學術導向，堅持科學性、學術性、先進性、創(chuàng)新性，刊載內容涉及的欄目：學習貫徹精神、豐湖論法、哲學、歷史、文學·傳媒、經濟、教育·教學等。于1981年經新聞總署批準的正規(guī)刊物。
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