摘要:目的研究老瓜頭生物總堿對(duì)小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞的增殖抑制與促進(jìn)凋亡的作用。方法采用小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞,MTT法檢測(cè)老瓜頭生物總堿對(duì)B16細(xì)胞增殖的抑制作用,通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳、Hoechst 33258染色、Caspase-3和Caspase-8活性檢測(cè),觀察老瓜頭生物總堿誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用和機(jī)制。結(jié)果 MTT檢測(cè)顯示老瓜頭生物總堿抑制B16細(xì)胞的增殖,呈現(xiàn)時(shí)間依賴性和濃度依賴性,作用24、48、72h的IC50分別為0.97、0.98、0.16mg·L^-1;選用濃度0.25、0.5、1mg·L^-1老瓜頭生物總堿孵育B16細(xì)胞24h,經(jīng)DNA Ladder檢測(cè)出現(xiàn)階梯狀DNA Ladder,片段100~200bp,呈現(xiàn)細(xì)胞凋亡裂解;0.5、1mg·L^-1老瓜頭生物總堿孵育B16細(xì)胞24h后Rhodamine 123染色與空白對(duì)照組相比顯示熒光降低,且隨濃度增加,熒光降低增加;凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-8活性增強(qiáng),0.5、1mg·L^-1老瓜頭生物總堿藥物組與對(duì)照組相比有顯著性差異(P〈0.05,P〈0.01)。結(jié)論老瓜頭生物總堿可抑制B16細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)B16細(xì)胞凋亡,可通過(guò)增強(qiáng)凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8活性誘導(dǎo)凋亡。
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