日本血吸蟲成蟲抗原通過ROS誘導(dǎo)人LX-2肝星狀細(xì)胞NLRP3炎癥小體活化和膠原表達(dá)
摘要：為了探討日本血吸蟲成蟲抗原（SWA）對LX-2細(xì)胞NLRP3炎癥小體活化和纖維化相關(guān)基因表達(dá)的影響,以及活性氧（ROS）在其中的作用,本文首先采用不同濃度（0、25、50、100μg/mL）的SWA刺激LX-2細(xì)胞,通過實時熒光定量PCR（Real-time PCR）和Western blot檢測細(xì)胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、 α-SMA和ColⅠ的基因和蛋白表達(dá),ELISA檢測細(xì)胞IL-1β 的分泌水平;同時使用CCK-8（Cell Counting Kit-8）法檢測細(xì)胞活性,乳酸脫氫酶（LDH）檢測試劑盒檢測細(xì)胞LDH的釋放;流式細(xì)胞術(shù)檢測SWA刺激對LX-2細(xì)胞中ROS產(chǎn)生的影響;之后使用ROS清除劑N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）處理細(xì)胞,檢測NLRP3、IL-1β、Caspase-1、 α-SMA、ColⅠ基因和蛋白的表達(dá)水平.結(jié)果顯示,當(dāng)SWA的濃度達(dá)100μg/mL時,LX-2細(xì)胞內(nèi)NLRP3、Caspase-1、IL-1β、 α-SMA和ColⅠ的mRNA的表達(dá)與對照組相比均明顯升高,同時相關(guān)蛋白的表達(dá)和IL-1β的分泌也顯著升高.流式檢測結(jié)果顯示,SWA刺激LX-2細(xì)胞后能顯著增加細(xì)胞內(nèi)ROS的生成,并在NAC處理后,可見明顯抑制細(xì)胞內(nèi)ColⅠ和炎癥小體活化相關(guān)的基因和蛋白的表達(dá).結(jié)果提示,SWA可以誘導(dǎo)LX-2細(xì)胞內(nèi)炎癥小體活化和膠原表達(dá),并且ROS反應(yīng)可能在介導(dǎo)NLRP3活化中發(fā)揮重要的作用.
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寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報雜志
寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報雜志， 季刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：論文、綜述、簡報、論壇等。于1994年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。
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