摘要：[目的]本文旨在克隆不結(jié)球白菜BcATPA(ATPase alpha subunit)基因并研究其功能及其在不育系和可育系中的表達(dá)差異。[方法]構(gòu)建BcATPA重組質(zhì)粒,在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行核苷酸序列分析,得到不結(jié)球白菜ATPA基因全長(zhǎng)序列。利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)BcATPA基因在不結(jié)球白菜保持系和不育系的不同組織和器官及不同小孢子發(fā)育時(shí)期的時(shí)空表達(dá)情況。[結(jié)果]獲得了不結(jié)球白菜ATPA基因全長(zhǎng)序列,命名為BcATPA。該基因的核苷酸序列全長(zhǎng)為1 806 bp,其最大開放閱讀框長(zhǎng)度為1 527 bp,編碼508個(gè)包含F(xiàn)1-ATP酶α亞基保守區(qū)域的氨基酸,并且含有ATP結(jié)合、walker A motif和walker B motif等位點(diǎn),而且在287~315的位置含有29個(gè)氨基酸的跨膜區(qū)域。BcATPA與蕓薹屬中的芥菜、甘藍(lán)型油菜和擬南芥親緣關(guān)系特別近,二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)表明,該基因與ATP結(jié)合有關(guān)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果表明,BcATPA在不育系中的表達(dá)水平高于保持系,在花瓣、萼片中表達(dá)水平較高。在整個(gè)小孢子發(fā)育時(shí)期,不育系中BcATPA基因表達(dá)量逐漸降低;而在保持系中,從四分體時(shí)期開始顯著下降,因此不育系與保持系表達(dá)量差異逐漸加大。[結(jié)論]BcATPA基因在不結(jié)球白菜不育系和保持系的各個(gè)器官和整個(gè)小孢子發(fā)育時(shí)期的表達(dá)水平存在差異,研究結(jié)果為進(jìn)一步研究BcATPA基因與細(xì)胞質(zhì)雄性不育之間的關(guān)系提供了理論依據(jù)。