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玉米皮纖維發(fā)酵培養(yǎng)裂褶菌的轉錄組分析和重組α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的異源表達

作者:劉玉春; 郭超; 郭偉群 國家糧食和物資儲備局科學研究院; 北京100037

摘要:玉米皮是玉米淀粉加工的副產(chǎn)物,玉米皮纖維降解酶的開發(fā)對提高玉米皮的利用價值有重要意義。通過測定玉米皮纖維為唯一碳源發(fā)酵培養(yǎng)裂褶菌的轉錄組,共獲得23656個Unigene,平均GC含量為0.5897。序列分析顯示共有5個木聚糖酶基因,分別屬于糖苷水解酶第10家族和第11家族;有6個α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因,分別屬于糖苷水解酶第43、51和62家族。克隆了糖苷水解酶62家族蛋白基因Sabf32,該蛋白編碼序列全長975 bp,N端有21個氨基酸的信號肽序列;完成了Sabf32在畢赤酵母中的表達,并驗證了Sabf32的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶催化活性,其最適溫度為40℃,最適pH為4.0,在pH 3.5~5.5和40℃下較穩(wěn)定;Sabf32比酶活力為16.18 U/mg,Km和Vmax分別為(3.98±0.32)mmol/L和(2.59±0.09)μmol/(min·mg)。

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