摘要：目的:制備抗樹鼩IgE高親和力受體α亞基(FcεRIα)的單克隆抗體,并對(duì)其免疫學(xué)特性進(jìn)行檢測(cè)。方法:采用大腸桿菌原核表達(dá)樹鼩IgEFcεRIα蛋白,經(jīng)過純化后免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾細(xì)胞與Sp2/0細(xì)胞融合;通過ELISA法和有限稀釋法篩選雜交瘤細(xì)胞;利用Protein A純化單克隆抗體,Western印跡檢測(cè)其特異性,間接免疫熒光及免疫組化對(duì)單克隆抗體進(jìn)行分析。結(jié)果:用純化的樹鼩IgEFCεRIα蛋白免疫小鼠,選取效價(jià)高的小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞Sp2/0融合,經(jīng)過3輪亞克隆篩選,篩選出5株抗樹鼩IgE FCεRIα單克隆抗體,分別命名為HC020、HC021、HC022、HC023和HC024,細(xì)胞間接免疫熒光表明5株單克隆抗體均能檢測(cè)到293T細(xì)胞中表達(dá)的IgE FCεRIα,其中HC020、HC022、HC024能夠通過免疫組化檢測(cè)組織切片中的IgE FCεRIα。結(jié)論:制備了5株IgE FCεRIα單克隆抗體,為今后研究樹鼩IgE FCεRIα奠定了基礎(chǔ)。