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利用RNA-Seq發(fā)掘玉米葉片形態(tài)建成相關的調控基因

作者:郭書磊; 魯曉民; 齊建雙; 魏良明; 張新; 韓小花; 岳潤清; 王振華; 鐵雙貴; 陳彥惠 河南省農業(yè)科學院糧食作物研究所/河南省玉米生物學重點實驗室; 鄭州450002; 河南農業(yè)大學農學院; 鄭州450046

摘要:【目的】葉片寬度和長度等葉形特性是決定植株形態(tài),進而影響種植密度的重要農藝性狀,通過轉錄組測序技術篩選并挖掘玉米葉片形態(tài)建成相關的代謝路徑及調控基因,為深入認識葉片發(fā)育的分子機理和鑒定葉寬、葉長候選基因奠定基礎?!痉椒ā恳詷O端窄葉自交系NL409和寬葉自交系WB665為材料,利用RNA-Seq技術鑒定7葉期第七片葉近基部的差異表達基因(DEGs),通過生物信息學分析,篩選與葉片發(fā)育密切相關的代謝通路,利用qRT-PCR驗證不同激素路徑葉形相關基因的表達結果,并結合啟動子區(qū)域的序列差異挖掘葉形功能基因?!窘Y果】分析對照(WB665)和樣品(NL409)高通量測序結果,在葉寬形成關鍵部位共篩選出5 199個DEGs,其中,2 264(43.55%)個基因表達上調,2 935(56.45%)個基因下調表達,下調基因明顯多于上調基因;GO功能富集分析表明,差異基因主要富集在細胞膜相關的細胞組分中,涉及代謝過程和細胞響應刺激;KEGG富集分析表明,差異基因主要參與到核糖體、植物激素信號轉導、苯丙烷類代謝、乙醛酸和二羧酸代謝等過程,其中核糖體、植物激素信號轉導、鞘脂類代謝下調表達基因較多的路徑與葉片發(fā)育密切相關。核糖體路徑富集到多個PRS(PRESSED FLOWER)基因,分析發(fā)現PRS13(PFL2)可能在調控窄葉發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用。鞘脂代謝路徑富集的基因幾乎全部下調表達,引起抑制葉片發(fā)育的AP1(APETALA1)類和MAPK(Mitogen-Activated Protein Kinase)類基因上調,以及促進葉片發(fā)育的LFY(LEAFY)下調,與窄葉發(fā)育受抑制的表型一致。植物激素信號轉導路徑富集到的油菜素內酯(BR)響應基因和赤霉素(GA)代謝基因下調,細胞分裂素(CTK)和大部分生長素(Auxin)響應基因上調,與窄葉中DELLA蛋白基因上調表達,抑制GA并促進CTK基因表達的作用模式一致。通過qRT-PCR對18個葉片發(fā)育相關基因進行分析,結果表明,其表達?

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中國農業(yè)科學雜志, 半月刊,本刊重視學術導向,堅持科學性、學術性、先進性、創(chuàng)新性,刊載內容涉及的欄目:

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等。于1960年經新聞總署批準的正規(guī)刊物。

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