摘要：為研究腸炎沙門菌異檸檬酸脫氫酶(IDH)的功能,本研究利用λ-Red重組技術(shù)構(gòu)建了腸炎沙門菌IDH編碼基因icdA缺失突變株c50336ΔicdA,對其進(jìn)行生長和生化特性檢測,并通過體外模擬應(yīng)激試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)、生物被膜檢測、抗蛋清殺傷、胞內(nèi)存活和動物感染實(shí)驗(yàn),分析icdA基因在腸炎沙門菌致病機(jī)制中的重要作用。研究結(jié)果顯示,icdA基因缺失不影響腸炎沙門菌的生長特性和生化特性,在熱應(yīng)激(42℃)、酸應(yīng)激(pH3.5)和高滲應(yīng)激(NaCl2.4mol/L)條件下其存活率也未出現(xiàn)顯著變化,但icdA基因缺失能夠顯著降低腸炎沙門菌對堿、低滲透壓和過氧化氫應(yīng)激的抵御能力,降低腸炎沙門菌對多粘菌素B的耐藥性和生物被膜的形成能力;同時,該基因缺失能夠降低腸炎沙門菌對蛋清殺傷的防御能力、在巨噬細(xì)胞內(nèi)的存活能力和其對小鼠的毒力。研究結(jié)果表明icdA基因參與腸炎沙門菌的抗應(yīng)激能力、耐藥性、生物被膜形成和抗蛋清殺傷能力,從而影響細(xì)菌的毒力。本研究為腸炎沙門菌疫苗的研究奠定了重要基礎(chǔ)。