摘要:目的探討體外近曲小管肝型脂肪酸結合蛋白(L-FABP)在IgA腎?。↖gAN)中的卜調機制及其對腎臟的保護作用。方法原代培養(yǎng)的小鼠系膜細胞(MC)與不同濃度的多聚IgA(AIgA)(10~250mg/L)共孵育48h,取上清作為AIgA-MC介質。分別應用不同濃度的AIgA、AIgA-MC介質、中和性抗腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體及重組鼠TNF—α刺激小鼠近曲小管上皮細胞系mProx和通過轉染穩(wěn)定表達人L—FABP(hL—FABP)基因的mProx(mProx—L)細胞。實時熒光定量PCR方法檢測細胞中的hL—FABP和單核細胞趨化蛋白1(MCP一1)的mRNA表達。Western印跡方法檢測細胞中的hL—FABP蛋白和4一羥壬烯醛(4一HNE)修飾蛋白的表達。結果(1)AIgA—MC介質顯著上調mProx—L細胞的hL—FABPmRNA和蛋白的表達(P〈0.01),而AIgA刺激不能上調hL—FABP的表達。(2)中和性抗TNF一僅抗體(終質量濃度為1和5mg/L)的預孵育可以顯著抑制AIgA—MC介質對hL—FABP蛋白表達的上調效應(P〈0.05和P〈0.01)。(3)重組鼠TNF—α(終質量濃度為50和250ng/L)呈劑量依賴性顯著上調hL—FABP蛋白的表達(P〈0.01)。(4)AIgA—MC介質刺激后,mProx—L細胞4一HNE修飾蛋白和MCP一1mRNA的表達水平顯著低于mProx細胞(P〈0.05和P〈0.01)。結論IgAN中系膜細胞源性TNF—α可以誘導腎小管L—FABP表達的上調。腎小管高表達的L.FABP抑制了氧化應激和炎性反應,發(fā)揮了腎臟保護作用。
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